利洋水产

03-192026

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两种细菌对斑节对虾免疫和DNA甲基化相关基因表达的影响

汪丽婷1,2黄建华1,3周发林1,3李运东1,3姜松1,3杨其彬1,3江世贵1史健志1,3丁阳阳1,3杨丽诗1,3

1.中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室2.上海海洋大学水产与生命学院3.三亚热带水产研究院

摘要：明确斑节对虾(Penaeus monodon)应对细菌感染的免疫应答机制及其表观遗传调控特征，可为病害防控策略提供重要理论支持。本研究通过体内注射革兰氏阴性菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、革兰氏阳性菌粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和磷酸盐缓冲液(PBS)，探讨了两种细菌对斑节对虾组织学、免疫能力和DNA甲基化水平的影响。采用肝胰腺和鳃组织切片观察及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行分析。苏木精-伊红(HE)染色结果显示，副溶血弧菌感染后，斑节对虾肝胰腺小管上皮细胞脱落，同时鳃丝收缩；注射粪肠球菌后，肝胰腺小管细胞出现坏死，鳃组织多发生水肿、出血现象。qRT-PCR结果表明，两种细菌刺激后均能显著上调抗菌肽基因(Crustin)和热休克蛋白70基因(Hsp70)的表达；且脂多糖-β-1, 3-葡聚糖结合蛋白基因(LGBP)在鳃组织中显著上调，脂肪酸结合蛋白基因(Fabp)在肝胰腺组织中显著上调。感染两种细菌均能显著上调肝胰腺和鳃组织中的甲基化CpG结合蛋白2基因(MBD2)、泛素样含植物同源结构域和环指结构域1基因(UHRF1)和DNA甲基转移酶2基因(DNMT2)的表达水平，但副溶血弧菌的刺激效果更明显。研究表明，斑节对虾的免疫基因及DNA甲基化相关基因在副溶血弧菌和致病性粪肠球菌的侵染下均显著上调表达，证实这些基因通过调控宿主生理功能在抗感染防御中发挥关键作用。还原

关键词：

斑节对虾;副溶血弧菌;粪肠球菌;组织学切片;免疫相关基因;DNA甲基化相关基因;

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