脯氨酸对中华鳖受损裙边细胞生长及胶原代谢的影响
摘要：脯氨酸是动物的条件性必需氨基酸，具有重要的营养、代谢和免疫功能。为探究脯氨酸对中华鳖裙边细胞氧化应激的影响及作用机制，以中华鳖胚胎期裙边成纤维细胞为研究对象，建立脂多糖诱导的氧化应激模型，并在细胞培养体系中添加脯氨酸，分为正常对照组、脂多糖组和脯氨酸+脂多糖组，通过噻唑蓝(MTT)、苏木精-伊红(HE)染色，DCFH-DA探针及实时荧光定量PCR方法，测定细胞活力、活性氧含量及胶原代谢相关基因mRNA表达水平。试验结果显示：与对照组相比，脂多糖组中华鳖应激细胞的数量和存活率显著下降，活性氧水平极显著上升；胶原合成相关基因Col1α1、Col1α2、Col3α1的mRNA表达丰度显著降低(P<0.05),胶原降解相关基因MMP1、MMP18的mRNA表达显著提高(P<0.05),相应地，胶原降解关键酶MMPs特异性抑制因子TIMP2、TIMP3和TIMP4的mRNA水平显著下降(P<0.05)。与脂多糖组相比，添加脯氨酸显著促进了中华鳖应激细胞的生长增殖(P<0.01),显著降低活性氧含量(P<0.05),显著降低胶原降解相关基因MMP18的mRNA表达(P<0.05),并显著升高胶原合成相关基因Col3α1、MMPs特异性抑制因子TIMP2和TIMP3的mRNA相对表达丰度(P<0.05)。试验结果表明，脯氨酸能够缓解脂多糖诱导的中华鳖裙边细胞氧化应激，可能通过改变活性氧信号通路、调节胶原代谢相关酶MMPs及其特异性抑制因子TIMPs的表达从而发挥作用。本试验初步揭示了脯氨酸对脂多糖诱导损伤的中华鳖裙边细胞生长及胶原代谢的影响，可为应用脯氨酸等同类功能性氨基酸提升中华鳖的抗应激能力提供理论依据。 还原
返回列表
